bloodjourГематология и трансфузиологияRussian journal of hematology and transfusiology0234-57302411-3042ООО Издательский дом «Практика»10.35754/0234-5730-2019-64-1-73-78bloodjour-127Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESПОЛУЧЕНИЕ ОЧИЩЕННОГО КОНЦЕНТРАТА ФИБРИНОГЕНАPRODUCTION OF PURIFIED FIBRINOGEN CONCENTRATEХурдинВ. В.KhurdinV. V.

Хурдин Вячеслав Викторович, аспирант

Vyacheslav V. Khurdin*, Postgraduate Researcher, Department of Biotechnology and Industrial Pharmacy

khurdin90@gmail.comБерковскийА. Л.BerkovskiyA. L.

Берковский Арон Леонидович, кандидат биологических наук, консультант

Aron L. Berkovsky, Cand. Sci. (Med.), Consultant

aron_56@mail.ruСергееваЕ. В.SergeevaE. V.

Сергеева Елена Владимировна, заведующая производством

Elena V. Sergeeva, Production Manager

serg_helen@mail.ruСуворовА. В.SuvorovA. V.

Суворов Александр Владимирович, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник

Alexander V. Suvorov, Cand. Sci. (Biol.), Senior Researcher

suvorov1983@mail.ruФГБОУ ВО «МИРЭА — Российский технологический университет»РоссияMIREA-Russian Technological UniversityRussian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияNational Medical Research Center for HematologyRussian FederationНПО «Ренам» МБООИ «Общество больных гемофилией»РоссияNPO Renam “Society of Hemophilia Patients”Russian Federation2019100820196417378Copyright © Хурдин В.В., Берковский А.Л., Сергеева Е.В., Суворов А.В., 20192019Хурдин В.В., Берковский А.Л., Сергеева Е.В., Суворов А.В.Khurdin V.V., Berkovskiy A.L., Sergeeva E.V., Suvorov A.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.htjournal.ru/jour/article/view/127

Цель работы — разработать метод получения концентрата фибриногена, свободного от балластных белков, для производства гемостатического препарата на основе фармацевтической субстанции фибриногена.

Материалы и методы

Материалы и методы. Метод основан на выделении фибриногена из раствора криопреципитата осаждением раствором полиэтиленгликоля с последующей вирусной инактивацией сольвент/детергентом. Очистку от продуктов вирусной инактивации и балластных белков проводили путем двухступенчатой обработки полученного концентрата фибриногена раствором глицина.

Результаты

Результаты. Разработанная лабораторная методика выделения фибриногена была оптимизирована по основным параметрам и масштабирована в условиях опытного производства.

Заключение

Заключение. Разработанная лабораторная методика выделения фибриногена характеризуется высоким выходом целевого продукта и может применяться при производстве гемостатического препарата.

Aim

Aim. To present a technique for obtaining fibrinogen concentrate purified from ballast proteins, which can be used in hemostatic drug production.

Materials and methods

Materials and methods. The proposed method is based on isolating fibrinogen from a cryoprecipitate solution by its precipitation with a polyethylene glycol solution followed by virus inactivation by a solvent/detergent. Purification from viral inactivation products and ballast proteins is performed by a two-step processing of the obtained fibrinogen concentrate with glycine solution.

Results

Results. The developed laboratory method for isolating fibrinogen has been optimized in terms of main parameters and scaled in pilot production.

Conclusion

Conclusion. The presented laboratory technique for fibrinogen extraction is characterized by a high yield of the target product, thus being suitable for the production of hemostatic drugs.

фибриногенпрепараты кровифибриновый клейфракционирование плазмыгипофибриногенемияfibrinogenblood drugsfibrin glueplasma fractionationhypofibrinogenemiaReferencesRedman C., Xia H. Fibrinogen biosynthesis. Ann N Y Acad Sci. 2001; 936: 480–95.Redman C., Xia H. Fibrinogen biosynthesis. Ann N Y Acad Sci. 2001; 936: 480–95.Козлов А.А., Берковский А.Л., Качалова Н.Д. и др. Пособие для врачейлаборантов по методам исследования плазменного гемостаза. Факторы свертывания крови. М.: Ренам; 2008.Kozlov A.A., Berkovskij A.L., Kachalova N.D., et al. The manual for laboratory assistant on methods of studying plasma hemostasis. Coagulation factors. Moscow: Renam; 2008 (In Russian).Братчик А.М. Клинические проблемы фибринолиза. Киев; 1993.Bratchik A.M. Clinical problems of fibrinolysis. Kiev; 1993 (In Russian).Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. Казань; 2000.Zubairov D.M. Molecular basis of blood clotting and thrombus formation. Kazan; 2000 (In Russian).Mosesson M.W. Fibrnogen and fibrin structure and functions. J Thromb Haemost. 2005; 3: 1894–904.Mosesson M.W. Fibrnogen and fibrin structure and functions. J Thromb Haemost. 2005; 3: 1894–904.Крайнова Т.А., Пискарева Ю.К., Анастасиев В.В. Препараты крови. Инструктивно-методические материалы по контролю и производству. М.; 1976.Krajnova T.A., Piskareva Yu.K., Anastasiev V.V. Blood medicine. Instructive and methodological materials for control and production. Мoscow; 1976 (In Russian).Инструкция по проведению донорского прерывистого плазмафереза. Утверждена Министерством здравоохранения России 23.09.2002.Instruction for conducting donor intermittent plasmapheresis. The Ministry of Health of Russia, 23.09.2002 (In Russian).Технический Регламент «О требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии». Утвержден Постановлением Правительства Российской Федерации от 26 января 2010 г. № 29.Technical Regulations on blood safety requirements, its products, blood-substituting solutions and technical equipment used in transfusion-infusion therapy. Approved RF Government Decree of 26 January. 2010, № 29 (In Russian).Billy D., Speijer H., Zwaal R.F.A., et al. Anticoagulant and membrane-degrading effects of secretory (non-pancreatic) phospholipase A2, are inhibited in plasma. Thromb. Haemost. 2002; 87: 978–84.Billy D., Speijer H., Zwaal R.F.A., et al. Anticoagulant and membrane-degrading effects of secretory (non-pancreatic) phospholipase A2, are inhibited in plasma. Thromb. Haemost. 2002; 87: 978–84.Yermolenko I.S., Lishko V.K., Ugarova T.P., Magonov S.N. High-resolution visualization of fibrinogen molecules and fibrin fibers with atomic force microscopy. Biomacromolecules. 2011; 12: 70–9.Yermolenko I.S., Lishko V.K., Ugarova T.P., Magonov S.N. High-resolution visualization of fibrinogen molecules and fibrin fibers with atomic force microscopy. Biomacromolecules. 2011; 12: 70–9.Brown J.H., Volkmann N., Jun G., et al. The crystal structure of modified bovine fibrinogen. Proc Natl Acad Sci USA. 2000; 97, 85–90.Brown J.H., Volkmann N., Jun G., et al. The crystal structure of modified bovine fibrinogen. Proc Natl Acad Sci USA. 2000; 97: 85–90.Brown A.E., Litvinov R.I., Discher D.E., Weisel J.W. Forced unfolding of coiledcoils in fibrinogen by single-molecule AFM. Biophys J. 2007; 92: 39–41.Brown A.E., Litvinov R.I., Discher D.E., Weisel J.W. Forced unfolding of coiledcoils in fibrinogen by single-molecule AFM. Biophys J. 2007; 92: 39–41.Brown A.E., Litvinov R.I., Discher D.E., et al. Multi-scale mechanics of fibrin polymer: gel stretching with protein unfolding and loss of water. Science. 2009; 325: 741–4.Brown A.E., Litvinov R.I., Discher D.E., et al. Multi-scale mechanics of fibrin polymer: gel stretching with protein unfolding and loss of water. Science. 2009; 325: 741–4.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.