bloodjourГематология и трансфузиологияRussian journal of hematology and transfusiology0234-57302411-3042ООО Издательский дом «Практика»10.35754/0234-5730-2025-70-2-264-272bloodjour-642Research ArticleКЛИНИЧЕСКИЕ НАБЛЮДЕНИЯCASE REPORTSСлучай выявления редкого фенотипа Del у донора кровиA case of rare Del phenotype in a blood donorhttps://orcid.org/0009-0007-3032-6262КараВ. В.KaraV. V.

Кара Вадим Васильевич - врач клинической лабораторной диагностики отделения трансфузиологии.

124489, Москва

Vadim V. Kara - Doctor of Clinical Laboratory Diagnostics, Division of Transfusiology.

124489, Moscow

vadim29-00@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4605-8315ДанилецВ. В.DaniletsV. V.

Данилец Виолетта Вячеславовна - заведующая отделением трансфузиологии.

124489, Москва

Violetta V. Danilets - Head of the Department of Transfusiology.124489, Moscow

gb3opk@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7634-2053РайкинаЕ. В.RaykinaE. V.

Райкина Елена Владиславовна - кандидат медицинских наук, заведующая лабораторией молекулярной биологии.

117198, Москва

Elena V. Raykina - Cand. Sci. (Med.), Head of the LaboratoryofMolecular Biology.

117198, Moscow

Elena.Raykina@dgoi.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5912-3564ЧумакА. А.ChumakA. A.

Чумак Анна Александровна - кандидат медицинских наук, заведующая лабораторией HLA-типирования.

125284, Москва

Anna A. Chumak - Cand. Sci. (Med.), Head of the Laboratory for HLA-typing.

125284, Moscow

gella5@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1547-4212ШрагинаО. А.ShraginaO. A.

Шрагина Ольга Андреевна - врач клинической лабораторной диагностики лаборатории молекулярной биологии.

117198, Москва

Olga A. Shragina - Doctor of Clinical Laboratory Diagnostics of the Molecular Biology Laboratory.

117198, Moscow

olga.shragina@dgoi.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5051-1656ПогонинА. В.PogoninA. V.

Погонин Алексей Владимирович - кандидат медицинских наук, главный врач.

124489, Москва

Aleksey V. Pogonin - Cand. Sci. (Med.), Chief Physician.

124489, Moscow

PogoninAV@zdrav.mos.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8508-5984ДроздТ. С.DrozdT. S.

Дрозд Тамара Станиславовна - биолог отделения трансфузиологии.

124489, Москва

Tamara S. Drozd - Biologist, Division of Transfusiology.

124489, Moscow

Peru6ko@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4376-8840МартыноваЕ. А.MartynovaE. A.

Мартынова Екатерина Александровна - врач клинической лабораторной диагностики отделения трансфузиологии.

124489, Москва

Ekaterina A. Martynova - Doctor of Clinical Laboratory Diagnostics, Division of Transfusiology.

124489, Moscow

emart1971@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6999-8145БулановА. Ю.BulanovA. Yu.

Буланов Андрей Юльевич - доктор медицинских наук, главный внештатный специалист трансфузиолог Департамента здравоохранения города Москвы; ведущий научный сотрудник отдела биотехнологий и трансфузиологии ГБУЗ «Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы».

129090, Москва

Andrey Yu. Bulanov - Dr. Sci. (Med.), Chief Transfusiology Specialist of the Moscow Healthcare Department, Leading Researcher, Department of Biotechnology and Transfusiology.

129090, Moscow

BulanovAY@sklif.mos.ruГБУЗ «Городская клиническая больница имени М.П. Кончаловского Департамента здравоохранения города Москвы»РоссияCity Clinical Hospital named after M.P. KonchalovskyRussian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияDmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and ImmunologyRussian FederationГБУЗ «Центр крови имени О.К. Гаврилова Департамента здравоохранения Москвы»РоссияMoscow City Blood Center named after O.K. GavrilovRussian FederationГБУЗ «Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы»РоссияN.V. Sklifosovsky Research Institute of Emergency MedicineRussian Federation202510072025702264272Copyright © Кара В.В., Данилец В.В., Райкина Е.В., Чумак А.А., Шрагина О.А., Погонин А.В., Дрозд Т.С., Мартынова Е.А., Буланов А.Ю., 20252025Кара В.В., Данилец В.В., Райкина Е.В., Чумак А.А., Шрагина О.А., Погонин А.В., Дрозд Т.С., Мартынова Е.А., Буланов А.Ю.Kara V.V., Danilets V.V., Raykina E.V., Chumak A.A., Shragina O.A., Pogonin A.V., Drozd T.S., Martynova E.A., Bulanov A.Y.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.htjournal.ru/jour/article/view/642Введение

Введение. Высокоиммуногенный антиген D — один из наиболее важных после групповых антигенов A и B. Многочисленные аллели гена RHD приводят кпоявлению новых фенотипов антигена D. Фенотип Del характеризуется сверхслабой экспрессией антигена D.

Цель

Цель: представить результаты типирования антигена D у донора крови с фенотипом Del.

Материалы иметоды

Материалы иметоды. Для серологического типирования крови донора использовали технологию микроколоночной агглютинации и твердофазную микропланшетную технологию «Capture». Первичное генотипирование донора выполняли методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (АСП-ПЦР). Был проведен поиск нуклеотидных замен методом секвенирования по Сэнгеру продуктов ПЦР экзонов гена RHD.

Результаты

Результаты. При проведении серологического типирования с анти-D-антителами IgM и IgG с использованием твердофазной микропланшетной технологии был получен положительный результат. При определении парциальных вариантов антигена D однозначно интерпретировать полученные данные не получилось. Для идентификации вариантов антигена weak D потребовалось проведение молекулярно-генетического анализа. По результатам первичного генотипирования методом АСП-ПЦР было сделано предположение о делеции 9-го экзона гена RHD либо нуклеотидной замене в 9-м экзоне. По результатам секвенирования по Сэнгеру в экзоне 9 был обнаружен вариант нуклеотидной последовательности ДНК с. 1203T>A, приводящий к образованию стоп-кодона Tyr401Ter (rs759513820). Данный генетический вариант соответствует аллелю RHD*01EL.17. Антиген, кодируемый этим аллелем, относится к типу Del.

Заключение

Заключение. Необходимо применять иммуногематологические методы в сочетании с молекулярно-генетическими методами для типирования антигена D у доноров крови с фенотипом Del с целью предотвращения аллоиммунизации антигеном D.

Introduction

Introduction. The highly immunogenic D antigen is one of the most important antigens after the group antigens A and B. Numerous alleles of the RHD gene lead to the emergence of new D antigen phenotypes. The Del phenotype is characterized by an extremely weak expression of the D antigen.

Aim

Aim: to present the results of D antigen typing in a blood donor with the Del phenotype.

Materials and methods

Materials and methods. Two technologies were used for serologic typing of donor blood: microcolumn agglutination technology and solid phase microplate Capture technology. Primary genotyping of the donor was performed by allele-specific polymerase chain reaction (ASP-PCR). Nucleotide substitutions were searched for by Sanger sequencing of PCR products of exons of the RHD gene.

Results

Results. When serological typing with IgM and IgG anti-D antibodies using solid-phase microplate technology was performed, a positive result was obtained. When determining partial variants of the D antigen, it was not possible to unambiguously interpret the data obtained. Molecular genetic analysis was required to identify variants of the weak D antigen. The results of primary genotyping by ASP-PCR suggested deletion of exon 9 of the RHD gene or nucleotide substitution in exon 9. According to the results of Sanger sequencing, a variant of the DNA nucleotide sequence c.1203T>A was detected in exon 9, resulting in the formation of the stop codon Tyr401Ter (rs759513820). This genetic variant corresponds to the RHD*01EL.17 allele. The antigen encoded by this allele is of the Del type.

Conclusion

Conclusion. It is necessary to use immunohematological methods in combination with molecular genetic methods for D antigen typing in blood donors with the Del phenotype in order to prevent alloimmunization with the D antigen.

фенотип Delрезус-факторантигены эритроцитовиммуногематологиягенотипированиеDel phenotypeRh-factorerythrocyte antigensimmunohematologygenotypingРабота не имела спонсорской поддержкиthis study was not supported by any external sources of fundingReferencesNadarajan V.S. Serological analysis of Rh antigens: how far can we go? Ann Blood. 2023;8:40. DOI: 10.21037/aob-23-30.Nadarajan V.S. Serological analysis of Rh antigens: how far can we go? Ann Blood. 2023;8:40. DOI: 10.21037/aob-23-30.Wagner F.F., Flegel W.A. RHD gene deletion occurred in the Rhesus box. Blood. 2000;95(12):3662–8. DOI: 10.1182/blood.v95.12.3662.012k12_3662_3668.Wagner F.F., Flegel W.A. RHD gene deletion occurred in the Rhesus box. Blood. 2000;95(12):3662–8. DOI: 10.1182/blood.v95.12.3662.012k12_3662_3668.Wagner F.F., Moulds J.M., Flegel W.A. Genetic mechanisms of Rhesus box variation. Transfusion. 2005;45(3):338–44. DOI: 10.1111/j.15372995.2005.04339.x.Wagner F.F., Moulds J.M., Flegel W.A. Genetic mechanisms of Rhesus box variation. Transfusion. 2005;45(3):338–44. DOI: 10.1111/j.15372995.2005.04339.x.Geoff D., Imelda B. Essential Guide to Blood Groups. John Wiley & Sons, Nov 11, 2013. Medical. 131 p.Geoff D., Imelda B. Essential Guide to Blood Groups. John Wiley & Sons, Nov 11, 2013. Medical. 131 p.Westhoff C.M. The structure and function of the Rh antigen complex. Semin Hematol. 2007;44(1):42–50. DOI: 10.1053/j.seminhematol.2006.09.010.Westhoff C.M. The structure and function of the Rh antigen complex. Semin Hematol. 2007;44(1):42–50. DOI: 10.1053/j.seminhematol.2006.09.010.Colin Y., Chérif-Zahar B., Le Van Kim C., et al. Genetic basis of the RhD-positive and RhD-negative blood group polymorphism as determined by Southern analysis. Blood. 1991;78(10):2747–52. DOI: 10.1182/blood.v78.10.2747.bloodjournal78102747.Colin Y., Chérif-Zahar B., Le Van Kim C., et al. Genetic basis of the RhD-positive and RhD-negative blood group polymorphism as determined by Southern analysis. Blood. 1991;78(10):2747–52. DOI: 10.1182/blood.v78.10.2747.bloodjournal78102747.Cruz B.R., Chiba A.K., Moritz E., et al. RHD alleles in Brazilian blood donors with weak D or D-negative phenotypes. Transfusion medicine. 2012;22(2):84–9. DOI: 10.1111/j.1365-3148.2011.01129.x.Cruz B.R., Chiba A.K., Moritz E., et al. RHD alleles in Brazilian blood donors with weak D or D-negative phenotypes. Transfusion medicine. 2012;22(2):84–9. DOI: 10.1111/j.1365-3148.2011.01129.x.Flegel W.A. Blood group genotyping in Germany. Transfusion. 2007;47(1 Suppl):47S–53S. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2007.01310.x.Flegel W.A. Blood group genotyping in Germany. Transfusion. 2007;47(1 Suppl):47S–53S. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2007.01310.x.Beckers E.A., Faas B.H., Ligthart P., et al. Lower antigen site density and weak D immunogenicity cannot be explained by structural genomic abnormalities or regulatory defects of the RHD gene. Transfusion. 1997;37(6):616–23. DOI: 10.1046/j.1537-2995.1997.37697335156.x.Beckers E.A., Faas B.H., Ligthart P., et al. Lower antigen site density and weak D immunogenicity cannot be explained by structural genomic abnormalities or regulatory defects of the RHD gene. Transfusion. 1997;37(6):616–23. DOI: 10.1046/j.1537-2995.1997.37697335156.x.Körmöczi G.F., Gassner C., Shao C.P., et al. A comprehensive analysis of DEL types: partial DEL individuals are prone to anti-D alloimmunization. Transfusion. 2005;45(10):1561–7. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2005.00584.x.Körmöczi G.F., Gassner C., Shao C.P., et al. A comprehensive analysis of DEL types: partial DEL individuals are prone to anti-D alloimmunization. Transfusion. 2005;45(10):1561–7. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2005.00584.x.Kulkarni S., Mohanty D., Gupte S., et al. Flow cytometric quantification of antigen D sites on red blood cells of partial D and weak D variants in India. Transfus Med. 2006;16(4):285–9. DOI: 10.1111/j.13653148.2006.00667.xKulkarni S., Mohanty D., Gupte S., et al. Flow cytometric quantification of antigen D sites on red blood cells of partial D and weak D variants in India. Transfus Med. 2006;16(4):285–9. DOI: 10.1111/j.13653148.2006.00667.xWagner F. F. Serology and molecular biology of DEL: a narrative review. Ann Blood 2023;8:28. DOI: 10.21037/aob-22-16.Wagner F. F. Serology and molecular biology of DEL: a narrative review. Ann Blood 2023;8:28. DOI: 10.21037/aob-22-16.Schmidt L.C., Castilho L., Vieira O.V., et al. Impact of a confirmatory RhD test on the correct serologic typing of blood donors. Rev Bras Hematol Hemoter. 201;37(5):302–5. DOI: 10.1016/j.bjhh.2015.06.001.Schmidt L.C., Castilho L., Vieira O.V., et al. Impact of a confirmatory RhD test on the correct serologic typing of blood donors. Rev Bras Hematol Hemoter. 201;37(5):302–5. DOI: 10.1016/j.bjhh.2015.06.001.Fichou Y., Le Maréchal C., Jamet D., et al. Establishment of a medium-throughput approach for the genotyping of RHD variants and report of nine novel rare alleles. Transfusion. 2013;53(8):1821–8. DOI: 10.1111/trf.12009.Fichou Y., Le Maréchal C., Jamet D., et al. Establishment of a medium-throughput approach for the genotyping of RHD variants and report of nine novel rare alleles. Transfusion. 2013;53(8):1821–8. DOI: 10.1111/trf.12009.Cohn C., Delaney M., Johnson S., et al. Technical manual. 20th edition. Bethesda, MD: AABB, 2020.Cohn C., Delaney M., Johnson S., et al. Technical manual. 20th edition. Bethesda, MD: AABB, 2020.Okubo Y., Yamaguchi H., Tomita T., et al. A D variant, Del? Transfusion. 1984;24(6):542. DOI: 10.1046/j.1537-2995.1984.24685066827.x.Okubo Y., Yamaguchi H., Tomita T., et al. A D variant, Del? Transfusion. 1984;24(6):542. DOI: 10.1046/j.1537-2995.1984.24685066827.x.Kwon D.H., Sandler S.G., Flegel W.A. DEL phenotype. Immunohematology. 2017;33(3):125–32. DOI: 10.21307/immunohematology-2019-019.Kwon D.H., Sandler S.G., Flegel W.A. DEL phenotype. Immunohematology. 2017;33(3):125–32. DOI: 10.21307/immunohematology-2019-019.Flegel W.A., Wagner F.F. DEL. Blood Transfus. 2020;18(3):159–62. DOI: 10.2450/2020.0296-19.Flegel W.A., Wagner F.F. DEL. Blood Transfus. 2020;18(3):159–62. DOI: 10.2450/2020.0296-19.Gassner C., Doescher A., Drnovsek T.D., et al. Presence of RHD in serologically D-, C/E+ individuals: a European multicenter study. Transfusion. 2005;45(4):527– 38. DOI: 10.1111/j.0041-1132.2004.04211.x.Gassner C., Doescher A., Drnovsek T.D., et al. Presence of RHD in serologically D-, C/E+ individuals: a European multicenter study. Transfusion. 2005;45(4):527– 38. DOI: 10.1111/j.0041-1132.2004.04211.x.Jeong D., Oh S., Song E.Y., et al. Molecular Characteristics of the Serological Weak D Phenotype in Koreans. Diagnostics. 2021;11(6):920. DOI: 10.3390/diagnostics11060920.Jeong D., Oh S., Song E.Y., et al. Molecular Characteristics of the Serological Weak D Phenotype in Koreans. Diagnostics. 2021;11(6):920. DOI: 10.3390/diagnostics11060920.Hundhausen T., Petershofen E.K., Doescher A., et al. RHCE-D-CE hybrid genes can cause false-negative DNA typing of the Rh e antigen. Vox Sang. 2002;83(3):268–72. DOI: 10.1046/j.1423-0410.2002.00220.x.Hundhausen T., Petershofen E.K., Doescher A., et al. RHCE-D-CE hybrid genes can cause false-negative DNA typing of the Rh e antigen. Vox Sang. 2002;83(3):268–72. DOI: 10.1046/j.1423-0410.2002.00220.x.International Society of Blood Transfusion Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology. (ISBT 004) RHD blood group allelesv6.431-JUL-2023. https://www.isbtweb.org/resource/004rhd.htmlInternational Society of Blood Transfusion Red Cell Immunogenetics and Blood Group Terminology. (ISBT 004) RHD blood group allelesv6.431-JUL-2023. https://www.isbtweb.org/resource/004rhd.htmlDajak S., Krstic J.L., Körmöczi G., et al. Characteristics and frequency of DEL phenotype detected by indirect antiglobulin test in Dalmatia county of Croatia. Transfus Apher Sci. 2014;50(2):210–3. DOI: 10.1016/j.transci.2014.01.019.Dajak S., Krstic J.L., Körmöczi G., et al. Characteristics and frequency of DEL phenotype detected by indirect antiglobulin test in Dalmatia county of Croatia. Transfus Apher Sci. 2014;50(2):210–3. DOI: 10.1016/j.transci.2014.01.019.Gu J., Wang X.D., Shao C.P., et al. Molecular basis of DEL phenotype in the Chinese population. BMC Med Genet. 2014;15:54. DOI: 10.1186/1471-235015-54.Gu J., Wang X.D., Shao C.P., et al. Molecular basis of DEL phenotype in the Chinese population. BMC Med Genet. 2014;15:54. DOI: 10.1186/1471-235015-54.Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BMC Genet. 2001;2:10. DOI: 10.1186/1471-2156-2-10.Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BMC Genet. 2001;2:10. DOI: 10.1186/1471-2156-2-10.Wagner F.F. RHD PCR of D-Negative Blood Donors. Transfus Med Hemother. 2013;40(3):172–81. DOI: 10.1159/000351604.Wagner F.F. RHD PCR of D-Negative Blood Donors. Transfus Med Hemother. 2013;40(3):172–81. DOI: 10.1159/000351604.Polin H., Danzer M., Gaszner W., et al. Identification of RHD alleles with the potential of anti-D immunization among seemingly D-blood donors in Upper Austria. Transfusion. 2009;49(4):676–81. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2008.02046.x.Polin H., Danzer M., Gaszner W., et al. Identification of RHD alleles with the potential of anti-D immunization among seemingly D-blood donors in Upper Austria. Transfusion. 2009;49(4):676–81. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2008.02046.x.Krog G.R., Clausen F.B., Berkowicz A., et al. Is current serologic RhD typing of blood donors sufficient for avoiding immunization of recipients? Transfusion. 2011;51(11):2278–85. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2011.03156.x.Krog G.R., Clausen F.B., Berkowicz A., et al. Is current serologic RhD typing of blood donors sufficient for avoiding immunization of recipients? Transfusion. 2011;51(11):2278–85. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2011.03156.x.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.