Влияние увеличения количества повторных измерений на точность определения активности фактора VIII и концентрации фибриногена в плазме крови

Введение. Высокоточное определение гемостатических показателей плазмы и продуктов плазмы крови значимо для производственной трансфузиологии и контроля эффективности их клинического применения. Повторные измерения увеличивают статистическую мощность, тем самым снижая вероятность совершения ошибки второго рода, которая описывается как ложноотрицательный результат и возникает, когда тест не может обнаружить действительно существующий эффект.

Цель — оценить влияние увеличения количества повторных измерений на точность определения активности фактора VIII и концентрации фибриногена в донорской плазме.

Материалы и методы. Использованная в исследовании человеческая донорская плазма была получена путем центрифугирования цельной крови. Критерием включения биоматериала в исследование было наличие неповторяющейся комбинации характеристик донора: пол, возраст, группа крови и резус-принадлежность по наличию антигена D. Донорами цельной крови для данной работы были мужчины и женщины в возрасте от 38 до 53 лет с группами крови: O (I), А (II) и B (III). Было выполнено по 27 повторяющихся измерений активности фактора VIII одностадийным клоттинговым методом и концентрации фибриногена клоттинговым методом по Клауссу на автоматическом коагулометре «ACL TOP 300» с реагентами «HemosIL».

Результаты. Для активности фактора VIII разница значений, зарегистрированных в повторяющихся измерениях, достигала 20 МЕ/100 мл, а для концентрации фибриногена максимальная разница составляла 0,29 г/л. Представлен расчет изменения доверительного интервала с увеличением числа повторных измерений. Если его уменьшение со второго по четвертое повторные измерения в среднем составило 83,5 % для измерений активности фактора VIII и 61,7 % для концентрации фибриногена, то с пятого по седьмой — 16,9 и 21,5 % соответственно.

Выводы. Несмотря на предпринимаемые преаналитические меры по уменьшению случайной погрешности, показатели плазмы крови одной и той же донации могут принимать значения в широком диапазоне. Увеличение количества повторных измерений с 1 до 3 в случае измерения активности фактора VIII и концентрации фибриногена является эффективным средством повышения точности определения показателей. Однако при повторных последующих измерениях будет происходить уменьшение прироста статистической мощности.

1. Галстян Г.М., Гапонова Т.В., Жибурт Е.Б. и др. Клиническое использование криопреципитата. Гематология и трансфузиология. 2020; 65(1): 87–114. DOI: 10.35754/0234-5730-2020-65-1-87-114.

2. Хурдин В.В., Берковский А.Л., Сергеева Е.В., Суворов А.В. Получение очищенного концентрата фибриногена. Гематология и трансфузиология. 2019; 64(1): 73–8. DOI: 10.35754/0234-5730-2019-64-1-73-78.

3. Жибурт Е.Б., Чемоданов И.Г., Шестаков Е.А. Производство криопреципитата в России: прошлое, настоящее и будущее. Гематология и трансфузиология. 2019; 64(1): 16–20. DOI: 10.35754/0234-5730-2019-64-1-16-20.

4. Пшениснов К.В., Александрович Ю.С. Массивная кровопотеря в педиатрической практике. Гематология и трансфузиология. 2020; 65(1): 70–86. DOI: 10.35754/0234-5730-2020-65-1-70-86.

5. Roubinian N., Kleinman S., Murphy E.L., et al. Methodological considerations for linked blood donor-component-recipient analyses in transfusion medicine research. ISBT Sci Ser. 2020; 15(1): 185–93. DOI: 10.1111/voxs.12518.

6. Лемонджава В.Н., Чечеткин А.В., Гудков А.Г. и др. Термолабильность фактора VIII в донорской свежезамороженной плазме крови. Гематология и трансфузиология. 2021; 66(4): 593-609. DOI: 10.35754/0234-57302021-66-4-593-609.

7. Bostrom F., Ekemar L., Olsson D., et al. Rapid thawing of fresh-frozen plasma with radio wave-based thawing technology and effects on coagulation factors during prolonged storage at 4°C. Vox Sang. 2009; 97(1): 34–8. DOI: 10.1111/j.1423-0410.2009.01175.x.

8. Kuta P., Melling N., Zimmermann R., et al. Clotting factor activity in fresh frozen plasma after thawing with a new radio wave thawing device. Transfusion. 2019; 59(5): 1857–61. DOI: 10.1111/trf.15246.

9. Von Heymann C., Pruss A., Sander M., et al. Thawing procedures and the time course of clotting factor activity in fresh-frozen plasma: A controlled laboratory investigation. Anesth Analg. 2006; 103(4): 969–74. DOI: 10.1213/01.ANE.0000240416.56803.5B.

10. Tholpady A., Monson J., Radovancevic R., et al. Analysis of prolonged storage on coagulation Factor (F)V, FVII, and FVIII in thawed plasma: is it time to extend the expiration date beyond 5 days? Transfusion. 2012; 53(3): 645–50. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2012.03786.x.

11. Dhantole L., Dubey A., Sonker A. A study on factors infl uencing the hemostatic potential of fresh frozen plasma. Asian J Transfus Sci. 2019; 13(1): 23–9. DOI: 10.4103/ajts.AJTS_139_17.

12. Zwagemaker A., Kloosterman F., Gouw S., et al. Little discrepancy between one-stage and chromogenic factor VIII (FVIII)/IX assays in a large international cohort of persons with nonsevere hemophilia A and B. J Thromb Haemost. 2023; 21(4): 850–61. DOI: 10.1016/j.jtha.2022.11.040.

13. Peyvandi F., Oldenburg J., Friedman K.D. A critical appraisal of one‐stage and chromogenic assays of factor VIII activity. J Thromb Haemost. 2016; 14(2): 248–61. DOI: 10.1111/jth.13215.

14. Van Moort I., Meijer P., Priem-Visser D., et al. Analytical variation in factor VIII onestage and chromogenic assays: Experiences from the ECAT external quality assessment programme. Haemophilia. 2019; 25(1): 162–9. DOI: 10.1111/hae.13643.

15. McFarlane A., Aslan B., Raby A., et al. Internal Quality Control Practices in Coagulation Laboratories: recommendations based on a patterns-of-practice survey. Int J Lab Hematol. 2015; 37(6): 729–38. DOI: 10.1111/ijlh.12397.

16. Padmore R., Petersen K., Campbell C., et al. Practical application of mathematical calculations and statistical methods for the routine haematology laboratory. Int J Lab Hematol. 2022; 44(l): 11–20. DOI: 10.1111/ijlh.13934.

17. Lemondzhava V.N. Effect of forced hydrodynamic and mechanical impacts on speed of technological process of defrosting of blood plasma. Biomedicinskaya Radioelectronika. 2018; 11: 48–55. (In Russian). DOI: 10.18127/j15604136201811-08.

18. Lemondzhava V.N., Lemondzhava T.Yu., Gudkov A.G., et al. Technological optimization of the process of preparation of fresh frozen blood plasma to transfusion in devices for its thermal processing. AIP Conf Proc. 2023; 1(2605): 0200131–020013-5. DOI: 10.1063/5.0110400.

19. Isaacs M., Scheuermaier K., Levy B., et al. In vitro effects of thawing freshfrozen plasma at various temperatures. Clin Appl Thromb Hemost. 2004; 10(2): 143–8. DOI: 10.1177/107602960401000204.

20. Marquez C. P., Petersen J. R., Okorodudu A. O. Critically low sodium levels due to concentration gradients formed in patient samples after undergoing a freeze-thaw cycle. Clin Chim Acta. 2018; 484: 218–22. DOI: 10.1016/j.cca.2018.05.020.

21. Lima-Oliveira G., Adcock D.M., Salvagno G.L., et al. Mixing of thawed coagulation samples prior to testing: Is any technique better than another? Clin Biochem. 2016; 49(18): 1399–401. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2016.10.009.

22. Fijnvandraat K., Cnossen M.H., Leebeek F.W., Peters M. Diagnosis and management of haemophilia. BMJ. 2012; 344: e2707. DOI: 10.1136/bmj.e2707.

23. Lowe A.E., Jones R., Kitchen S., et al. Multicenter performance evaluation and reference range determination of a new one-stage factor VIII assay. J Clin Lab Anal. 2022; 36: e24294. DOI:10.1002/jcla.24294.

24. Akkaya E., Hatiboglu S., Koc B., et al. Evaluation of Chromogenic Factor VIII Assay Compared with One-Stage Clotting Assay. Clin Lab. 2020; 66(10): 191145. DOI: 10.7754/Clin.Lab.2020.191145.

25. Chandler W.L., Ferrell C., Lee J., et al. Comparison of three methods for measuring factor VIII levels in plasma. Am J Clin Pathol. 2003; 120(1): 34–9. DOI: 10.1309/C8T8-YNB4-G3W4-5PRF.

26. Farrugia A. Factor VIII manufactured from plasma—the ups and downs, and the up again: a personal journey—part 2: aspects of factor VIII manufacture from plasma. Ann Blood 2018; 3: 20. DOI: 10.21037/aob.2018.02.05.

27. Wolf MB. Hemoglobin-Dilution Method: Effect of Measurement Errors on Vascular Volume Estimation. Comput Math Methods Med. 2017; 2017: 3420590. DOI: 10.1155/2017/3420590.

28. Lippi G., Rossi R., Ippolito L., et al. Infl uence of residual platelet count on routine coagulation, factor VIII, and factor IX testing in postfreeze-thaw samples. Semin Thromb Hemost. 2013; 39(7): 834–9. DOI: 10.1055/s-0033-1356572.

29. Gudkov A.G., Leushin V.Y., Sidorov I.A., et al. A Functional Line of Plasma Extractors. Biomed Eng. 2021; 54(1): 350–3. DOI: 10.1007/s10527-021-10037-7.

30. Gudkov A.G., Leushin V.Y., Sidorov I.A., et al. Devices for Sealing Polymer Containers with Blood and Its Components. Biomed Eng. 2021; 54(1): 376–9. DOI: 10.1007/s10527-021-10043-9.

31. Галстян Г.М., Полеводова О.А., Яковлева Е.В., Щекина А.Е. Применение ротационной тромбоэластометрии для диагностики дефицита факторов свертывания и контроля гемостатической терапии у больных наследственными коагулопатиями. Гематология и трансфузиология. 2019; 64(3): 297– 316. DOI: 10.35754/0234-5730-2019-64-3-297-316.

32. Vetrova N.A., Lemondzhava V.N., Filyaev A.A., et al. Prediction of Safety Indicators for Donor Blood and Its Components in a Statistically Managed Technological Process Based on Bayesian Inversion. Biomed Eng. 2022; 56(2): 114–8. DOI: 10.1007/s10527-022-10179-2.

33. Pereira P., Seghatchian J., Caldeira B., Xavier S., de Sousa G. Statistical control of the production of blood components by control charts of attribute to improve quality characteristics and to comply with current specifi cations. Transfus Apher Sci. 2018; 57(2): 285–90. DOI: 10.1016/j.transci.2018.04.009.

34. Varlamov O.O., Chuvikov D.A., Lemondzhava V.N., et al. A Software Package Supporting Decision Making on the Safety of Thermolabile Blood Components. Biomed Eng. 2022; 55(1): 355–9. DOI: 10.1007/s10527-022-10135-0.

35. Vickers A.J. How many repeated measures in repeated measures designs? Statistical issues for comparative trials. BMC Med Res Methodol. 2003; 3: 22. DOI: 10.1186/1471-2288-3-22.

36. Sullivan L.M., Weinberg J., Keaney J.F. Common Statistical Pitfalls in Basic Science Research. J Am Heart Assoc. 2016; 5(10): e004142. DOI: 10.1161/JAHA.116.004142.