Морфофункциональные нарушения тромбоцитов у детей при эссенциальной тромбоцитемии и истинной полицитемии

Введение. Тромбозы и кровоточивость являются частыми осложнениями эссенциальной тромбоцитемии (ЭТ) и истинной полицитемии (ИП). Морфофункциональные нарушения тромбоцитов при этих состояниях изучены недостаточно.

Цель: изучить морфофункциональные характеристики тромбоцитов при ЭТ и ИП.

Материалы и методы. В исследование включены 39 больных младше 18 лет с установленным диагнозом ЭТ (n = 26) или ИП (n = 13). Контроль составили 40 здоровых детей. Оценивали проявления ишемических и геморрагических симптомов, гепатомегалии и/или спленомегалии. Изучали тромбоциты с использованием метода проточной цитометрии (ПЦ) с активацией смесью аналогов тромбина и коллагена. Измеряли активность фактора фон Виллебранда.

Результаты. В зависимости от наличия и типа драйверной мутации все больные были разделены на 3 группы. В первую группу вошли 16 больных с тройной негативной (triple-negative, ТN) формой ЭТ. Вторую группу составили 15 больных с JAK2 драйверной мутацией и диагнозами ИП или ЭТ. В третью группу вошли 8 больных с CALR драйверной мутацией и диагнозом ЭТ. Количество тромбоцитов было выше в группе TN при сравнении с группой JAK2 (p = 0,005) и не отличалось между группами TN и CALR (p = 0,98). Гепатомегалия наблюдалась у 36 % больных, спленомегалия — у 56 %. Приобретенный синдром Виллебранда развился у 64 % больных. Симптомы ишемии и/или кровоточивости наблюдались у 54 % больных. По результатам ПЦ размер неактивированных тромбоцитов был уменьшен во всех группах больных при сравнении с контрольной группой (p ≤ 0,01). Уменьшение размера тромбоцитов при активации было менее выражено в группах JAK2 и CALR (p ≤ 0,0015) при сравнении с контролем. Гранулярность тромбоцитов была снижена в группах TN и CALR (p ≤ 0,01) при сравнении с контролем. Морфологические нарушения тромбоцитов в виде повышения их гранулярности относительно размера клеток были выявлены у 58 % больных. Уменьшение количества CD42b на мембране тромбоцитов вследствие отщепления и интернализации было достоверно ослаблено во всех группах больных (p ≤ 0,01). Экстернализация CD61 на поверхность мембраны тромбоцитов при активации была ослаблена во всех группах больных (p ≤ 0,02). В группах JAK2 и CALR объем/количество плотных гранул тромбоцитов были достоверно снижены в покое (p ≤ 0,02), а при активации дегрануляция плотных гранул была ослаблена (p< 0,001) при сравнении с контролем.

Заключение. При ЭТ/ИП у детей и подростков выявлены общие морфофункциональные нарушения тромбоцитов (уменьшенный размер, нарушения экспрессии CD42b и CD61), не зависящие от генетической причины.

1. Kralovics R., Passamonti F., Buser A.S., et al. A Gain-of-Function Mutation of JAK2 in Myeloproliferative Disorders. New Engl J Med. 2005;352(17):1779–90. DOI: 10.1056/NEJMoa051113.

2. Nangalia J., Massie C.E., Baxter E.J., et al. Somatic CALR Mutations in Myeloproliferative Neoplasms with Nonmutated JAK2. New Engl J Med. 2013;369(25):2391–405. DOI: 10.1056/NEJMoa1312542.

3. Ding J., Komatsu H., Wakita A., et al. Familial essential thrombocythemia associated with a dominant-positive activating mutation of the c-MPL gene, which encodes for the receptor for thrombopoietin. Blood. 2004;103(11):4198–200. DOI: 10.1182/blood-2003-10-3471.

4. Tefferi A., Barbui T. Essential Thrombocythemia and Polycythemia Vera: Focus on Clini-cal Practice. Mayo Clin Proc. 2015;90(9):1283–93. DOI: 10.1016/j.mayocp.2015.05.014.

5. Thiele J., Kvasnicka H.M., Orazi A., et al. The international consensus classifi - cation of myeloid neoplasms and acute Leukemias: myeloproliferative neoplasms. Am J Hematol. 2023;98(1):166–79. DOI: 10.1002/ajh.26751.

6. Fu R., Zhang L., Yang R. Paediatric essential thrombocythaemia: Clinical and molecular features, diagnosis and treatment. Br J Haematol. 2013;163:295–302. DOI: 10.1111/bjh.12530.

7. Teofi li L., Foà R., Giona F., et al. Childhood polycythemia vera and essential thrombocythemia: does their pathogenesis overlap with that of adult patients? Haematologica. 2008;93(2 SE-Editorials):169–72. DOI: 10.3324/haematol.12002.

8. Alimam S., Harrison C.N. Thrombocytosis and Essential Thrombocythaemia. Springer International Publishing. 2017;873–86. DOI: 10.1007/978-3-319-47462-5.

9. Harris Z., Kaizer H., Wei A., et al. Characterization of myeloproliferative neoplasms in the paediatric and young adult population. Br J Haematol. 2023;201(3):449–58. DOI: 10.1111/bjh.18650.

10. Beauverd Y., Ianotto J.C., Thaw K.H., et al. Impact of treatment for adolescent and young adults with essential thrombocythemia and polycythemia vera. Leukemia. 2025;39(5):1135–45. DOI: 10.1038/s41375-025-02545-2.

11. Sobas M., Kiladjian J-J., Beauverd Y., et al. Real-world study of children and young adults with myeloproliferative neoplasms: identifying risks and unmet needs. Blood. Adv 2022;6(17):5171–83. DOI: 10.1182/bloodadvances.2022007201.

12. Kucine N., Cario H., Abu-Zeinah G., et al. A Toolkit for Healthcare Transition for Adolescents With Classical Myeloproliferative Neoplasms. Pediatr Blood Cancer. 2025;72(5):e31633. DOI: 10.1002/pbc.31633.

13. Michiels J.J, Abels J., Steketee J. Erythromelalgia Caused by Platelet-Mediated Arteriolar Infl ammation and Thrombosis in Thrombocythemia. Ann Int Med. 1985;102(4):466–71. DOI: 10.7326/0003-4819-102-4-466.

14. van Genderen P.J., Lucas I.S., van Strik R. et al. Erythromelalgia in essential thrombocythemia is characterized by platelet activation and endothelial cell dama ge but not by thrombin generation. Thromb Haemost. 1996;76(3):333–8.

15. Finazzi G., Carobbio A., Thiele J., et al. Incidence and risk factors for bleeding in 1104 patients with essential thrombocythemia or prefi brotic myelofi brosis diagnosed according to the 2008 WHO criteria. Leukemia. 2012;26(4):716–9. DOI: 10.1038/leu.2011.258.

16. Sugimoto Y., Nagaharu K., Ohya E., et al. Clinical characteristics in adolescents and young adults with polycythemia vera and essential thrombocythemia in Japan. Int J Hematol. 2024;120(6):684–93. DOI: 10.1007/s12185-024-03862-5.

17. Connor D.E., Ma D.D.F., Joseph J.E. Flow cytometry demonstrates differences in platelet reactivity and microparticle formation in subjects with thrombocytopenia or thrombocytosis due to primary haematological disorders. Thromb Res. 2013;132(5):572–7. DOI: 10.1016/j.thromres.2013.09.009.

18. Koprivnikar J., Kessler C. Thrombocytosis: Essential Thrombocythemia and Reactive Causes. Consultative Hemostasis and Thrombosis: Third Edition. 2013;298- 323. DOI: 10.1016/B978-1-4557-2296-9.00019-1.

19. Genderen P.J.J. Van., Leenknegt H., Michiels J.J., et al. Acquired von Willebrand Disease in Myeloproliferative Disorders. Leuk Lymphoma. 1996;22(sup 1):79–82. DOI: 10.3109/10428199609074364.

20. Budde U., Dent J.A., Berkowitz S.D., et al. Subunit Composition of Plasma von Willebrand Factor in Patients With the Myeloproliferative Syndrome. Blood. 1986;68(6):1213–7. DOI: 10.1182/blood.V68.6.1213.1213.

21. Lancellotti S., Dragani A., Ranalli P., et al. Qualitative and quantitative modifi cations of von Willebrand factor in patients with essential thrombocythemia and controlled platelet count. J Thromb Haemost. 2015;13(7):1226–37. DOI: 10.1111/jth.12967.

22. Arber D.A., Orazi A., Hasserjian R., et al. The 2016 revision to the World Health Organization classifi cation of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood. 2016;127(20):2391–405. DOI: 10.1182/blood-2016-03-643544.

23. Ignatova A.A., Ponomarenko E.A., Polokhov D.M., et al. Flow cytometry for pediatric platelets. Platelets. 2019;30(4):428–37. DOI: 10.1080/09537104.2018.1513473.

24. Picard A., Bayart S., Deparis M., et al. Polycythemia vera and essential thrombocythemia in children, still a challenge for pediatricians. Eur J Pediatr. 2025;184(2):173. DOI: 10.1007/s00431-025-05993-1.

25. Inano T., Araki M., Morishita S., et al. Cell-autonomous megakaryopoiesis associated with polyclonal hematopoiesis in triplenegative essential thrombocythemia. Sci Rep. 2021;11(1):17702. DOI: 10.1038/s41598-021-97106-9.

26. Soyer N., Haznedaroğlu İ.C., Cömert M., et al. Multicenter Retrospective Analysis of Turkish Patients with Chronic Myeloproliferative Neoplasms. Turk J Hematol. 2017;34(1):27–33. DOI: 10.4274/tjh.2016.0005.

27. Olschok K., Han L., Toledo M.A.S., et al. CALR frameshift mutations in MPN patient-derived iPSCs accelerate maturation of megakaryocytes. Stem Cell Rep. 2021;16(11):2768–83. DOI: 10.1016/j.stemcr.2021.09.019.

28. Sim X., Jarocha D., Hayes V., et al. Identifying and enriching platelet-producing human stem cell–derived megakaryocytes using factor V uptake. Blood. 2017;130(2):192–204. DOI: 10.1182/blood-2017-01-761049.

29. Babarović E., Marijić B., Vranić L., et al. A Comparison of Bone Marrow Morphology and Peripheral Blood Findings in Low and High Level JAK2 V617F Allele Burden. Diagnostics. 2023;13(12):2086. DOI: 10.3390/diagnostics13122086.

30. Falanga A., Marchetti M., Vignoli A., et al. V617F JAK-2 mutation in patients with essen-tial thrombocythemia: relation to platelet, granulocyte, and plasma hemostatic and infl ammatory molecules. Exp Hematol. 2007;35(5):702–11. DOI: 10.1016/j.exphem.2007.01.053.

31. Karakantza M., Giannakoulas NC., Zikos P., et al. Markers of endothelial and in vivo plate-let activation in patients with essential thrombocythemia and polycythemia vera. Int J Hematol. 2004;79(3):253–9. DOI: 10.1532/IJH97.E0316.

32. Tong D., Yu M., Guo L., et al. Phosphatidylserine-exposing blood and endothelial cells contribute to the hypercoagulable state in essential thrombocythemia patients. Ann Hematol. 2018;97(4):605–16. DOI: 10.1007/s00277-018-3228-6.

33. Ponomarenko E.A., Ignatova A.A., Polokhov D.M., et al. Healthy pediatric platelets are moderately hyporeactive in comparison with adults’ platelets. Platelets. 2022;4;33(5):727–34. DOI: 10.1080/09537104.2021.1981848.

34. Polokhov D.M., Ershov N.M., Ignatova A.A., et al. Platelet function and blood coagulation system status in childhood essential thrombocythemia. Platelets. 2020;31(8):1001–11. DOI: 10.1080/09537104.2019.1704710.