Preview

Гематология и трансфузиология

Расширенный поиск

Идентификация групповых антигенов эритроцитов по системам ABO, RH и KEL серологическими тестами и методами генотипирования

https://doi.org/10.35754/0234-5730-2021-66-1-37-53

Полный текст:

Аннотация

Введение. Терапия компонентами крови востребована в травматологии, терапии, гематологии, родовспоможении, трансплантологии, что определяет важность тестирования групповых систем антигенов эритроцитов в  образцах крови доноров и реципиентов для обеспечения безопасности гемотрансфузий. Использование рутинных технологий для иммунологического типирования в большинстве случаев позволяет определить антигены, при исследовании которых наблюдаются слабые реакции агглютинации. Однако применение серологических методов имеет определенные ограничения, требующие использования технологий генотипирования.

Цель — оценить опыт использования серологических тестов и методов генотипирования при определении групповой принадлежности по системам ABO, RH и KEL.

Материалы и методы. Исследовали 55 489 образцов крови доноров, а также 1898 образцов крови больных. При затруднении интерпретации результата исследования (химеризм, панагглютинация, разночтение результатов) применяли методы генотипирования. Серологические исследования выполнены с помощью гелевой технологии. Выделение геномной ДНК проводили с использованием реагентов «Qiagen». Молекулярно-генетическое исследование эритроцитарных антигенов ABO, RH и KEL методом аллель-специфичной ПЦР выполняли с помощью реагентов производства BAG Diagnostics. Детекцию продуктов ПЦР осуществляли методом электрофореза в 2%-агарозном геле. Секвенирование по Сэнгеру было использовано в качестве вспомогательного метода генотипирования.

Результаты. Применение серологических методов определения антигенов эритроцитов в  сочетании с  методами генотипирования позволило установить групповую и резус-принадлежность 26 доноров и больных, имевших трудноопределимые группы крови.

Заключение. В случаях трудноопределимых групп крови наряду с серологическими методами исследования целесообразно использовать методы генотипирования.

Об авторах

А. А. Чумак
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Чумак Анна Александровна, кандидат медицинских наук, заведующая лабораторией HLA-типирования

125284, Москва



В. В. Белякова
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Белякова Вера Владимировна, кандидат биологических наук, заведующая централизованной клинико-диагностической лабораторией

125284, Москва



О. А. Майорова
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Майорова Ольга Андреевна, доктор медицинских наук, профессор, главный врач

125284, Москва



Т. В. Пухликова
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Пухликова Татьяна Владимировна, кандидат биологических наук, биолог лаборатории HLA-типирования

125284, Москва



О. А. Кравчук
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Кравчук Ольга Алексеевна, врач Централизованной клинико-диагностической лаборатории

125284, Москва



С. В. Мишакина
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Мишакина Светлана Владимировна, врач клинической лабораторной диагностики Централизованной клинико-диагностической лаборатории

125284, Москва



О. В. Донская
ГБУЗ «Центр крови имени О. К. Гаврилова» Департамента здравоохранения города Москвы
Россия

Донская Ольга Владимировна, врач клинической лабораторной диагностики Централизованной клинико-диагностической лаборатории

125284, Москва



В. В. Данилец
ГБУЗ «ГКБ имени М. П. Кончаловского Департамента здравоохранения города Москвы»
Россия

Данилец Виолетта Вячеславовна, заведующая отделением трансфузиологии

124489, Москва



Список литературы

1. Javadzadeh S.H., Hayati A. Blood group discrepancies at a regional blood center. Int J Hematol Oncol Stem Cell Res. 2020; 14(1): 38–44.

2. Kaur G., Kaur P., Basu S., Kaur R. Blood group discrepancies at a tertiary care centre — analysis and resolution. Int J Lab Hematol. 2014; 36(4): 481–7. DOI: 10.1111/ijlh.12176.

3. Garratty G. Do we need to be more concerned about weak D antigens? Transfusion. 2005; 45(10): 1547–51. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2005.00625.x.

4. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д. и др. Молекулярногенетические методы для определения групп крови эритроцитарных систем. Справочник заведующего КДЛ. 2018; 9: 46–56.

5. Goebel M., Halm-Heinrich I., Parkner A., et al. Novel ABO gene variant leads to discrepant results in forward/reverse and molecular blood grouping. Transfus Med Hemother. 2013; 40(6): 454–8. DOI: 10.1159/000356378.

6. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp/rs573234689#frequency_tab

7. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp/rs782058388#frequency_tab

8. Yip S.P. Sequence variation at the human ABO locus. Ann Hum Genet. 2002; 66(1): 1–27. DOI: 10.1017/S0003480001008995.

9. Olsson M.L., Chester M.A. Heterogeneity of the blood group Ax allele: Genetic recombination of common alleles can result in the Ax phenotype. Transfus Med. 1998; 8(3): 231–8. DOI: 10.1046/j.1365-3148.1998.00161.x.

10. Ogasawara K., Yabe R., Uchikawa M., et al. Molecular genetic analysis of variant phenotypes of the ABO blood group system. Blood. 1996; 88(7): 2732–7.

11. Seltsam A., Das Gupta C., Bade-Doeding C., Blasczyk R. A weak blood group A phenotype caused by a translation-initiator mutation in the ABO gene. Transfusion. 2006; 46(3): 434–40. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2006.00740.x.

12. Storry J.R., Olsson M.L. Genetic basis of blood group diversity. Br J Haematol. 2004; 126(6): 759–71. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2004.05065.x.

13. Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека: Руководство по иммуносерологии. Москва: Бином; 2011: 1016 с.

14. Головкина Л.Л., Каландаров Р.С., Стремоухова А.Г. и др. Дифференциация подгрупп А. и А2 антигена А системы АВО; биологическая основа и серологическая стратегия. Гематология и трансфузиология. 2019; 64(4): 504–15.

15. Жибурт Е.Б. Учебник. Трансфузиология. Санкт-Петербург: Питер; 2002: 736 с.

16. Seltsam A., Hallensleben M., Kollmann A., Blasczyk R. The nature of diversity and diversification at the ABO locus. Blood. 2003; 102(8): 3035–42. DOI: 10.1182/blood-2003-03-0955.

17. Khorshidfar M., Chegini A., Pourfathollah A.A., et al. Establishing blood group genotyping to resolve ABO discrepancies in Iran. Indian J Hematol Blood Transfus. 2019; 35: 538–43. DOI: 10.1007/s12288-018-1044-8.

18. Hosseini-Maaf B., Hellberg A., Chester A.M., et al. Structural basis for change in activity of naturally occurring mutants of six new identified B-subgroup alleles in human ABO. Transfusion. 2007; 47(5): 864–75. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2007.01203.x.

19. Минеева Н.В. Основы иммуногематологии. Группы крови человека. Изд. 2-е. Санкт-Петербург; 2007: 188 с.

20. Flegel W.A. Molecular genetics and clinical applications for RH. Transfus Apher Sci. 2011; 44(1): 81–91. DOI: 10.1016/j.transci.2010.12.013.

21. Flegel W. The genetics of the Rhesus Blood Group system. Blood transfusion. 2007; 5: 50–7. DOI: 10.2450/2007.0011-07.

22. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д. и др. Молекулярносерологические характеристики типов слабого антигена D системы резус. Терапевтический архив. 2016; 88(7): 78–83. DOI: 10.17116/terarkh201688778-83f.

23. Shao C.P., Maas J.H., Su Y.Q., et al. Molecular background of Rh D-positive, D-negative, Del and weak D phenotypes in Chinese. Vox Sang. 2002; 83(2): 156–61. DOI: 10.1046/j.1423-0410.2002.00192.x.

24. Wagner F.F., Gassner C., Müller T.H., et al. Molecular basis of weak D phenotypes. Blood. 1999; 93(1): 385–93.

25. Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BMC Genet. 2001; 2: 10. DOI: 10.1186/1471-2156-2-10.

26. Sandler S.G., Flegel W.A., Westhoff C.M., et al.; College of American Pathologists Transfusion Medicine Resource Committee Work Group. It’s time to phase in RHD genotyping for patients with a serologic weak D phenotype. Transfusion. 2015; 55(3): 680–9. DOI: 10.1111/trf.12941.

27. Levitt J., ed. Standards for blood banks and transfusion service. 29th ed. American Association of Blood Banks; Bethesda, MD: 2014. http://www.aabb.org/sa/standards/Pages/standards-resources.aspx.

28. Flegel W.A. How I manage donors and patients with a weak D phenotype. Curr Opin Hematol. 2006; 13: 476–83. DOI: 10.1097/01.moh.0000245694.70135.c3.

29. Pham B.N., Roussel M., Peyrard T., et al. Anti-D investigations in individuals expressing weak D Type 1 or weak D Type 2: allo- or autoantibodies? Transfusion. 2011; 51(12): 2679–85. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2011.03207.x.

30. Постановление Правительства РФ от 22 июня 2019 г. № 797 «Об утверждении Правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и ее компонентов и о признании утратившими силу некоторых актов Правительства Российской Федерации».

31. Wagner F.F. RHD PCR of D-Negative Blood Donors. Transfus Med Hemother. 2013; 40(3): 172–81. DOI: 10.1159/000351604.

32. Головкина Л.Л., Стремоухова А.Г., Пушкина Т.Д. и др. Первый случай выявления фенотипа Rhnull системы Резус в России. Справочник заведующего КДЛ. 2015; 10: 14–20.

33. Flatt J.F., Musa R.H., Ayob Y., et al. Study of the D phenotype reveals erythrocyte membrane alterations in the absence of RHCE. Br J Haematol. 2012; 158: 262–73. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2012.09149.x.

34. Pour M.S.S., Soleimany S., Ghasemimehr N., et al. A case report of a rare Rh phenotype: D–. Indian J Hematol Blood Transfus. 2019; 35: 402–4. DOI: 10.1007/s12288-019-01089-7.

35. Denomme G.A. Prospects for the provision of genotyped blood for transfusion. Br J Haematol. 2013; 163: 3–9. DOI: 10.1111/bjh.12476.

36. Flegel W.A., Wagner F.F. DEL. Blood Transfus. 2020; 18(3): 159–62. DOI: 10.2450/2020.0296-19.

37. Standards for molecular testing for red cell, platelet, and neutrophil antigens. 5th ed. American Association of Blood Banks; Bethesda, MD: 2020. http://www.aabb.org/sa/standards/Pages/standards-resources.aspx.

38. Denomme G.A., Flegel W.A. Applying molecular immunohematology discoveries to standards of practice in blood banks: Now is the time. Transfusion. 2008; 48(11): 2461–75. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2008.01855.x.

39. van der Schoot C.E., Veldhuisen B., de Haas M. Will genotyping replace serology in future routine blood grouping? – Opinion 5. Transfus Med Hemother. 2009; 36(3): 234–5. DOI: 10.1159/000214840.

40. Reid M.E., Denomme G.A. DNA-based methods in the immunohematology reference laboratory. Transfus Apher Sci. 2011; 44(1): 65–72. DOI: 10.1016/j.transci.2010.12.011.


Для цитирования:


Чумак А.А., Белякова В.В., Майорова О.А., Пухликова Т.В., Кравчук О.А., Мишакина С.В., Донская О.В., Данилец В.В. Идентификация групповых антигенов эритроцитов по системам ABO, RH и KEL серологическими тестами и методами генотипирования. Гематология и трансфузиология. 2021;66(1):37-53. https://doi.org/10.35754/0234-5730-2021-66-1-37-53

For citation:


Chumak A.A., Belyakova V.V., Maiorova O.A., Pukhlikova T.V., Kravchuk O.A., Mishakina S.V., Donskaya O.V., Daniletz V.V. Identifi cation of ABO, RH and KEL blood group antigens with serology and genotyping methods. Russian journal of hematology and transfusiology. 2021;66(1):37-53. (In Russ.) https://doi.org/10.35754/0234-5730-2021-66-1-37-53

Просмотров: 230


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0234-5730 (Print)
ISSN 2411-3042 (Online)