ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ И ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЕ Т-КЛЕТОЧНОЙ КЛОНАЛЬНОСТИ В РАЗГРАНИЧЕНИИ ОПУХОЛЕВОЙ И РЕАКТИВНОЙ ПРОЛИФЕРАЦИИ БОЛЬШИХ ГРАНУЛЯРНЫХ ЛИМФОЦИТОВ

Введение. Пролиферация больших гранулярных лимфоцитов (БГЛ) может быть ассоциирована с вирусной инфекцией, аутоиммунными заболеваниями или быть проявлением хронического лимфопролиферативного заболевания NK-клеток (ХЛПЗ-NK) и Т-клеточного лейкоза из больших гранулярных лимфоцитов (T-ЛБГЛ). Дифференциальная диагностика пролиферации БГЛ до сих пор представляет определенные трудности.
Цель: оценить значение иммунофенотипирования методами проточной цитометрии и ПЦР-исследования Т-клеточной клональности в разграничении реактивной и опухолевой пролиферации БГЛ.
Материалы и методы. Проведен анализ основных клинико-лабораторных показателей у 68 пациентов с БГЛ -лимфоцитозом (20 мужчин и 48 женщин) в возрасте от 22 до 79 лет (медиана возраста 53 года). Всем больным было выполнено цитологическое исследование мазка периферической крови, иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови методом
проточной цитометрии, исследование Т-клеточной клональности методом ПЦР по реаранжировкам генов γ- и β-цепей T-клеточного рецептора.
Результаты. В результате исследования было показано, что морфологические и иммунофенотипические признаки, относительный и абсолютный лимфоцитоз, гетерогенность экспрессии Т-клеточных маркеров не позволяют разграничить опухолевую и реактивную пролиферацию БГЛ. Наиболее специфичным для разграничения реактивного и опухолевого БГЛ -лимфоцитоза оказалось одновременное выявление моноклональности по TCRG (V γ-J γ) и TCRG (V β-J β) локусам или выявление полной реаранжировки TCRG (V β-J β).

1. Loughran T. P. Jr. Clonal diseases of large granular lymphocytes. Blood. 1993; 82(1):1—14.

2. Sokol L., Loughran T. P. Jr. Large granular lymphocyte leukemia. Oncologist. 2006; 11(3):263—273. DOI: 10.1007/s11899-007-0038-7.

3. Lamy T., Loughran T. P. Jr. Large granular lymphocyte leukemia. Cancer Control. 1998; 5(1):25—33.

4. Swerdlow S. H., Campo E., Harris N. L. et al. WHO classification of tumors of haematopoietic and lymphoid tissues. Lyon: IARC; 2017, 348—350.

5. Zambello R., Trentin L., Facco M. et al. Analysis of the T cell receptor in the lymphoproliferative disease of granular lymphocytes: superantigen activation of clonal CD3+ granular lymphocytes. Cancer Res. 1995; 55(24):6140—6145.

6. Виноградова Ю. Е., Луценко И. Н., Кременецкая А. М. и др. Структура T/NK-клеточных лимфатических опухолей в Гематологическом научном центре РАМН. Проблемы гематологии и переливания крови. 2005; 4:30—34.

7. Lamy T., Loughran T. P. Jr. Clinical features of large granular lymphocyte leukemia. Semin Hematol. 2003; 40(3):185—195.

8. Sampalo Lainz A., López-Gómez M., Jimenez-Alonso J. Proliferation of large granular lymphocytes in patients with systemic lupus erythematosus. Rev Clin Esp. 1995; 195(6):373—379.

9. Starkebaum G. Chronic neutropenia associated with autoimmune disease. Semin Hematol. 2002; 39(2):121—127.

10. Morice W. G., Kurtin P. J., Leibson P. J. et al. Demonstration of aberrant T-cell and natural killer-cell antigen expression in all cases of granular lymphocytic leukaemia. Br J Haematol 2003; 120(6):1026—1036.

11. Semenzato G., Zambello R., Starkebaum G. et al. The lymphoproliferative disease of granular lymphocytes: updated criteria for diagnosis. Blood. 1997; 89(1):256—260.

12. Виноградова Ю. Е., Луценко И. Н., Самойлова Р. С. и др. Клинические и иммуноморфологические варианты Т/NK-клеточных лимфолейкозов из больших гранулярных лимфоцитов. Гематология и трансфузиология. 2009; 54(2):14—18.

13. Vie H., Chevalier S., Garand R. et al. Clonal expansion of lymphocytes bearing the gamma delta T-cell receptor in a patient with large granular lymphocyte disorder. Blood. 1989; 74(1):285—290.

14. Dongen J. J., Langerak A. W., Bruggemann M. et al. Design and standardization of PCR primers and protocols for detection of clonal immunoglobulin and T-cell receptor gene recombinations in suspect lymphoproliferations: report of the BIOMED-2 Concerted Action BMH4-CT98-3936. Leukemia. 2003; 17(12):2257—2317. DOI: 10.1038/sj.leu.2403202.

15. Хайдуков С. В., Байдун Л. В. Современные подходы к оценке клеточной составляющей иммунного статуса. Медицинский алфавит. 2015; 2(8):44—51.

16. Воробьев А. И., Воробьев И. А., Грецов Е. М. и др. Вопросы теоретической гематологии. Терапевтический архив. 2003; 75(9):22—29.

17. O’Keefe C. L., Plasilova M., Wlodarski M. et al. Molecular analysis of TCR clonotypes in LGL:a clonal model for polyclonal responses. J Immunol. 2004; 172(3):1960—1969.

18. Wlodarski M. W., O’Keefe C., Howe E. C. et al. Pathologic clonal cytotoxic T-cell responses: nonrandom nature of the T-cell-receptor restriction in large granular lymphocyte leukemia. Blood. 2005; 106(8):2769—2780. DOI: 10.1182/blood-2004-10-4045.

19. Pandolfi F., Loughran T. P. Jr., Starkebaum G. et al. Clinical course and prognosis of the lymphoproliferative disease of granular lymphocytes. A multicenter study. Cancer. 1990; 65(2):341—348.

20. Sidorova Yu. V., Chernova N. G., Ryzhikova N. V. et al. Clonal rearrangements and malignant clones in peripheral T-cell lymphoma. Acta Naturae (English version). 2015; 7(3):116—125.

21. Smirnova S., Sidorova Y., Chernova N. et al. CD8+ T-cell clones persistent in bone marrow and peripheral blood during course of CD4+ angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica. 2017; 102(1):578, E1403.

22. Сидорова Ю. В., Никитин Е. А., Меликян А. Л. и др. Определение T-клеточной клональности при инфекционном мононуклеозе методом ПЦР-SSCP-TCR γ. Гематология и трансфузиология 2004; 49(6):1—7.

23. Smirnova S. J., Sidorova J. V., Biderman B. V. et al. Expansion of CD8+ cells in autoimmune hemolytic anemia. Autoimmunity. 2 016; 49(3):147— 154. DOI: 10.3109/08916934.2016.1138219.

24. French L.E., Alcindor T., Shapiro M. et al. Identification of amplified clonal T cell populations in the blood of patients with chronic graftversus-host disease:positive correlation with response to photopheresis. Bone Marrow Transplant. 2002; 30(8):509—515. DOI: 10.1038/sj.bmt.1703705.

25. Narumi H., Kojima K., Matsuo Y. et al. T-cell large granular lymphocytic leukemia occurring after autologous peripheral blood stem cell transplantation. Bone Marrow Transplant. 2004; 33(1):99—101. DOI: 10.1038/sj.bmt.1704298.

26. Au W. Y., Lam C. C., Lie A. K. et al. T-cell large granular lymphocyte leukemia of donor origin after allogeneic bone marrow transplantation. Am J Clin Pathol 2003; 120(4):626—630. DOI: 10.1309/VA75-5A03-PVRV-9XDT.

27. Sychevskaya K. A., Smirnova S., Sidorova J. et al. Clonal T-lymphocyte populations in healthy donors. Blood. 2017; 130(1):3598.